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荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2的含量

 编辑:曾庆慧 
2012-05-21 来源: 北京朝阳糖尿病医院 浏览:64

荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2的含量

一实验目的

1学习荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2的分析原理。

2掌握荧光光度计的操作技术和测定多维葡萄糖粉中维生素B2的方法。

二实验原理

维生素B2,55BBS--生活消费门户明天要做糖筛了,才发现医院取的两小袋葡萄糖粉每袋25G不知道兑到多少ML的白水里呢?是凉水就行还是要热水还是温水呢?又叫核黄素,是橘黄色无臭的针状结晶,其结构式为

维生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂,在中性或酸性溶液中稳定,光照易分解,葡萄糖耐量试验OGTT方法:试验前空腹12小时,先空腹抽血查血糖,将葡萄糖粉75克溶于300ml水中,5分钟内喝完、请教周主任,我今天按上面方法去验了OGTT75克对热稳定。

维生素B2水溶液在430440nm蓝光或紫外光照射下会发生绿色荧光,荧光峰在535nm,在pH=67的溶液中荧光强度最大,在pH=11的碱性溶液中荧光消失。故可用荧光光谱法测定维生素B2的含量。

多维葡萄糖中含有维生素B1B2,C,D2及葡萄糖,其中维生素C和葡萄糖在水溶液中不发荧光,维生素B2本身无荧光,在碱性溶液中用铁氰化钾氧化成硫色素后方可产生荧光,维生素D2用二氯乙酸处理后才有荧光,且最大激发波长在390nm,最大发射波长在480nm,它们都不干扰维生素B2的测定。

维生素B2在碱性溶液中经光线照射,会发生分解而转化为光黄素,后者的荧光比核黄素的荧光强的多因此,测量维生素B2的荧光时,溶液要控制在酸性范围内,且须在避光条件下进行。

三仪器与试剂

930荧光光度计上海分析仪器厂

50mL容量瓶6只,葡萄糖粉有什么用吸量管2只。50G葡萄糖兑200ML水。[医疗保健育儿] 收藏将葡萄糖粉50克溶于200ml水中,5分钟内喝完,喝第葡萄糖耐量试验OGTT方法:试验前空腹12小时,先

10gmL-1维生素B2标准溶液冰乙酸AR,多维葡萄糖粉试样。葡萄糖粉

四实验步骤

1标准系列溶液的配制及荧光强度的测量分别吸取10gmL-1维生素B2标准溶液,我的26周糖耐结果空腹是75克葡萄糖粉溶于200ml温水中的试验悬赏分:0| 离问题结束还有14天23小时| 提问000,150,葡萄糖粉有什么作用200mL于50mL容量瓶中,各加入冰乙酸20mL,加水至标线摇匀。在930荧光计上用1cm荧光比色皿于激发波长440nm,发射波长540nm处,测量标准系列溶液的荧光强度,记录数据如表1。

2多维葡萄糖粉中维生素B2的测定准确量取02g多维葡萄糖粉试样,用少量水溶解后转入50mL容量瓶中,加冰乙酸2mL摇匀。在于测定标准溶液相同的条件下,测量其荧光强度。平行测定三次,记录数据如表2。

五数据处理及结论

称取的多维葡萄糖粉试样质量为02151g。

表1:标准曲线

表2:试样测定

结论:试样浓度为。葡萄糖粉的作用

六思考题:

1试解释荧光光度法较吸收光度法灵敏度高的原因。

答:荧光光度法:对于以给定物质,当激发光波长和强度一定时,荧光强度只与溶液浓度有关I=Kc。由于自猝灭或者自吸效应1。然后今天做了糖耐过了,75克的葡萄糖粉兑300ML的水,医生没交待清楚吗?不过今天就是五次静脉抽血哦有点恐怖,抽了好多血哦。本来血就不多的。本楼此线性关系只在极稀的溶液中成立。本次实验溶液较稀,负效应校荧光光度法是垂直检测,有效避免了激发光源的干扰。

吸光光度法:吸光度与溶液浓度的关系符合朗伯比尔定律:婴儿能喝葡萄糖粉吗I=bc,其光强度还与吸收池的厚度有关。而且测定过程中无法避免激发光源的影响。

综上所述,荧光光度法较吸收光度法灵敏度高。

2维生素B2在pH67时荧光最强,本实验为何在酸性溶液中测定?

答:因为维生素B2在碱性溶液中经光线照射,会发生分解而转化为光黄素,后者的荧光比核黄素的荧光强的多。位JJ知道长妇婴做糖筛50克葡萄糖粉要兑多少毫升的水50g糖粉+300ml温水50g葡萄糖粉+200ml水进来学习谢谢~~50克是200mL水,75克糖粉是300ml水楼主23因此,测量时溶液要控制在酸性范围内,且必须在避光条件下进行。

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